Diabetologia：激活但功能受损的记忆Tregs在1型糖尿病患者进展缓慢的处理过程中逐渐扩展

从第一次浮现肾脏自身免疫反应到浮现1型号心血管疾病病人呕吐的方面率在学童以前就有很好的描述，多个肾脏自身免疫反应阳性的学童里面有70%在血清转换后10天内患上心血管疾病，而随访15年的学童这一数目缩减到84%。相比之下之下，占病人1型号心血管疾病一半以上的型号1型号心血管疾病的发病机制还未取得充分的研究成果。

越来越多的人开始用作分期系统会来定义1型号心血管疾病的方面：个体在浮现多种肾脏自身免疫反应时带入第1过渡阶段，浮现血糖异常时带入第2过渡阶段，浮现呕吐时带入第3过渡阶段。一些多发肾脏自身免疫反应阳性的个体，在1期和2期，方面较快，并发展为发病的1型号心血管疾病。我们在此之前描述了都由在首次检测到多种肾脏自身免疫反应取样后有数10年无心血管疾病的亦然太快方面者，这四组患儿人数少，但不同之处非常一致。随后，我们发现肾脏化脓性特异性CD8+T细胞膜反应在方面减太快的患儿里面基本不长期存在，但在近期发病和长期长期存在的心血管疾病患儿里面很容易检测到。这可能会证明，与方面患儿相比之下，这些患儿化脓性反应的调节增强。

早期研究成果证明，尽管调节性T细胞膜(Treg)需求量长时间，但心血管疾病患儿长期存在一些特性缺陷，其里面之外对IL-2的反应能力增大。此外，心血管疾病患儿里面的物理现象CD4+T细胞膜可能会对调节亦然富抵抗性，观感为物理现象T细胞膜的诱导逼近，纯净转化成的Treg和体外转化成的诱导Treg，以及免疫经历的CD4+T细胞膜里面IL-2反应逼近。本研究成果的目的是描述了CD4+调节性T细胞膜(Treg)在一小群亦然减太快方面者里面的不同之处，他们的平均平均年龄为43岁(31-72岁)，随访星期为18-32年。

方式：BOX研究成果是一项以老年人进一步将的纵向研究成果，在21岁以下确诊的患儿亲属里面检查1型号心血管疾病的危险各种因素。我们在此之前描述了长期减太快方面者的不同之处，他们保持多重肾脏自身免疫反应阳性超过10年，但未浮现心血管疾病的病人呕吐，太快性或非进行时性化脓性。随后，10名继续保持无心血管疾病并主动提供大量尿液取样的减太快方面者归属于T和B细胞膜特性深入研究成果。在现今的研究成果里面，8名太快方面者(SP四组)，里面位平均年龄43岁(31-72岁)，18 - 32岁中间的肾脏自身免疫反应阳性。所有的参与者都受制于1型号心血管疾病方面的1期，尽管一些人随后耗尽了肾脏自身免疫反应对某些免疫的施打，然而，一名患儿已经受制于2期有数6年，但未浮现病人呕吐，一名患儿被病人为心血管疾病，该人脑72岁，在采集实验取样时，其HbA1c升高到53 mmol/mol(7%)，在数据深入研究成果里面对该NADP进行时了单独深入研究成果。分离外周血单个质叔父细胞膜(PBMCs)，采用多参数流式细胞膜术和T细胞膜诱导试验性深入研究成果NADP里面Treg的Hz、环境因素号和特性。用作FlowSOM和CITRUS(聚类深入研究成果、表征和重归)进行时无监督聚类深入研究成果，深入研究成果Treg环境因素号。

结果：与身体健康NADP相比之下，来自太快方面体的失忆CD4+T细胞膜的监督聚类说明了，诱导的失忆CD4+ TregHz缩减，与抗生素诱导的TNFR相关细胞(GITR)表述缩减有关。一名HbA1c升高的患儿与方面减太快者和归一化的对照四组相比之下，Treg谱有所不同。特性深入研究成果证明，与身体健康NADP相比之下，来自减太快方面体的Treg介导的CD4+物理现象T细胞膜诱导明显受损。观感为对物理现象CD4+T细胞膜CD25和CD134表述的诱导缩减。

由此可知1 深入的环境因素号深入研究成果说明了，CD4+Treg亚型号在太快方面链表里面缩减。由FlowSOM生成的Treg室，聚集在来自所有NADP的活CD4+CD45RA -细胞膜上。根据标示物表述深入研究成果不止10个元簇:失忆T细胞膜_1;失忆T cell_2;失忆T cell_3;失忆T cell_4;CD49b失忆T细胞膜;HLA-DR + GITR +失忆T细胞膜;文件系统会Treg_1;文件系统会Treg_2;文件系统会Treg_3;和文件系统会Treg_4。(a)用作9个不同Treg标示生成的10个元簇的MST。每个路由表代表人一个战略性(100个战略性)，更大的元战略性(10个元战略性)在路由表四组周围打磨。每个路由表里面的年糕由此可知说明单个标示的表述最高级别。(b)每个元聚类的热由此可知，以说明了整体标示表述。(c, d)为HD四组(c)和SP四组(d)生成由此可知，以及FlowSOM辨识的每个元簇的覆盖层。(e-l)比较同位素为每个metacluster箱线或由此可知(同位素> 0.05%)确切为HD和SP四组:文件系统会Treg_2 (e),文件系统会Treg_3 (f),文件系统会Treg_4 (g), HLA-DR + GITR +失忆T细胞膜(h)、失忆T cell_1(i),失忆T cell_2 (j),失忆T cell_3 (k) n d CD49b失忆T细胞膜(l)。深蓝色红色代表人**SP 606。**p< 0.01, Wilcoxon配对符号秩检查。此键适用于由此可知形部分(a)， (c)， (d)和d (e-l)

由此可知2 用作CITRUS的预测模型号证实，TregHz的缩减是方面减太快的徽章。分级门控(a - f)和柑橘深入研究成果(g-k)比起SP参与者和归一化的HD参与者在CD4+CD45RA−T细胞膜上的关联。(a)基因型CD25+ cd127 lotreg和CD25loCD127+T c e l族裔的近现代由此可知。CD25+ cd127lotreg被CD39和FOXP3富集，然后通过HLA-DR和GITR表述进行时分离，模拟FlowSOM族裔。(b) HD(黑点)和SP(布氏)四组以及NADPSP 606(深蓝色)里面CD25+ cd127的Hz概述由此可知。(c-f) CD25+CD127loCD39+FOXP3+和CD25loCD127+门控叔父集的箱线或由此可知;(c) HLA-DRloGITR−(文件系统会Treg_2)， (d) HLA-DRintGITRlo(文件系统会Treg_3)， (e) HLA- d RhiGITR+(文件系统会Treg_4)， (f) HLA- d RhiGITR+(HLA-DR+GITR+文件系统会T cell)。(g - i)木瓜簇螺旋由(g) CD127， (h) CD25和(i) FOXP3表述强度着色，左下角醒目的簇被辨识为SP和HD链表中间的不同。(j)箱线或由此可知说明了了在SP(布氏)和HD(灰点)四组里面，CITRUS失忆Treg_3和Treg_4的比较同位素(数目)。(k)概率分布说明了每个簇的环境因素号(黄色)和Treg标示比较表述与背景表述(蓝色);上列，文件系统会Treg_3;示意由此可知即刻，文件系统会Treg_4。背景与所有其他簇里面标示的表述有关。*p< 0.05， **p< 0.01, Wilcoxon配对符号秩检查

由此可知3 与身体健康献血者相比之下，方面减太快者失忆treg的GITR缩减。每个失忆CD4+T细胞膜元簇(失忆T细胞膜_1;失忆T cell_2;失忆T cell_3;CD49b +失忆T细胞膜;HLA-DR + GITR +失忆T细胞膜;文件系统会Treg_2;文件系统会Treg_3;来自FlowSOM的memory Treg_4)检测每个表述标示的变化。(a,b)来自HD (a)和S (b)链表的表述热由此可知(sp606不之外在内)。(c,d)失忆Treg_4元簇里面所有HD(黄褐色)、所有SP(蓝色)和SP 606(深蓝色)的FlowSOM GITR表述串联，说明了概率分布(c)和概述由此可知(d)。Wilcoxon配对符号秩和检查，p< 0.07(深蓝色)所有NADP之外，p< 0.05(蓝色)NADPSP 606和归一化的HD不之外在测试里面。(e,f) HLA-DRhiGITR+Tregs里面GITR表述，从分级门控，从所有HD(黄褐色)、所有SP(蓝色)和SP 606(深蓝色)串联，说明了概率分布(e)和概述由此可知(f) *p< 0.05, Wilcoxon配对符号秩检查

由此可知4 来自减太快方面的CD4+ treg细胞膜操控物理现象CD4+T细胞膜的能力增大。SP四组用蓝色的线或和红色说明，HD四组用银色的线或和红色说明，深蓝色的线或/红色说明NADPsp606。用作CD4+CD25+ Treg分选试剂盒对CD4+T细胞膜进行时分选。CD4+CD25−(反之亦然者)被标示为CFSE, Treg按观察的数目滴定。用抗CD3 /28微珠诱导细胞膜，培植3当晚进行时流式细胞膜术检测。(a-d)与CD4+反之亦然者比较应的treg培植(继发性)(e-h) HD、SP或SP 606 Treg与HD反之亦然者培植。(a,b,f) CFSE增殖(a,e)和CFSE诱导数目(b,f)。(c, d,h) CD25 (c,g)和CD134 (d,h)的诱导数目。用作阳性对照(诱导的响应细胞膜则有treg)计算诱导数目。*p< 0.05， **p< 0.01， ***p< 0.001，重复测量双向方差深入研究成果。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比起测试

由此可知5 物理现象CD4+T细胞膜对减太快方面的T细胞膜诱导的诱导更亦然端。SP四组用蓝色的线或和红色说明，HD四组用银色的线或和红色说明，深蓝色的线或/红色说明NADPsp606。用作CD4+CD25+Treg分选试剂盒对CD4+T细胞膜进行时分选。CD4+CD25−(反之亦然者)被cfsel标示，treg按观察的数目滴定。用抗CD3 /28微珠诱导细胞膜，培植3当晚进行时流式细胞膜术(CD25反染)和细胞膜因叔父深入研究成果。HD Treg与HD、SP或sp606反之亦然者共同培植。(a,b) CFSE增殖(a)和CFSE诱导花红(b)。(c,d) CD25诱导花红(c)和CD134诱导花红(d)。(e,f) IFN-γ(e)和IL-17A (f)在共培植里面的表述。***p< 0.001， **p< 0.01，重复测量双向方差深入研究成果。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比起测试

结论：我们得不止的结论是，来自减太快方面叔父的诱导失忆CD4+Treg在GITR表述里面取得了扩展到和丰富，务实了进一步研究成果Treg在1型号心血管疾病危险性个体里面的异质性的必要性。

译文引自：

Boldison J, Long AE, Aitken RJ,et al.Activated but functionally impaired memory Tregs are expanded in slow progressors to type 1 diabetes.Diabetologia 2021 Oct 28